1、土豆200克取汁，葡萄糖粉20克，琼脂20克，水1000毫升，磷酸二氢钾3克，硫酸镁一点五克，蛋白胨3克。
2、去皮土豆切片1000毫升开水中煮个三十分钟，煮熟后用纱布过滤取汁，注意水一定要够1000毫升，不够的可用开水补够，把土豆汁倒入盛有其他配料的容器中，一边倒一边搅拌，搅拌均匀。
3、把混合液吸入试管中，大概有试管的三分之一，用棉花把试管口塞紧，把装好的试管五六个用牛皮纸包裹好用绳子捆绑好，下部不要盖住以便以后操作观察，绑好的试管放入高压箱中高压消毒。
4、高压锅温度控制在120度，消毒三十分钟，取出试管后趁热斜着放置，以便试管中的液体凝固后有一个斜面，有利于菌丝的生长。
5、取新鲜的平菇用小刀切去中间的一小块，放入试管中培养，整个过程都要在无菌的环境中操作，整个器械都要用百分之七十五的酒精消毒。
6、放入保温箱中，保持二十五度的温度，十天左右平菇菌种母种便培育成功。
