高速公路夜间行车的注意事项有：注意行车安全、避免一个人开车出行、灵活运用灯光和夜间上高速提前安排、充分休息。
1、夜间高速公路行车更应注意行车安全。在高速上跟车最好不要跟大货车，基本上上高速的大货车都超载，超载让刹车距离增加，这样你跟在后面的话稍不留神就会追尾。
2、避免一个人开车出行。一个人开夜车不但乏味，更因为长时间无事可做导致精神松懈，这对于高速行驶的车辆来说尤其危险，所以如果能够找到一个陪着说话的人。
3、灵活运用灯光，白天准备提示前方车辆要超车，灯光比喇叭好使，灯光提示是最好的办法。在晚上，高速行车更要注意灯光的使用，有一些高速路段没有设计路灯，要合理使用远光灯。
4、夜间上高速提前安排、充分休息。夜间开车最常遇到的问题就是一个“困”字，疲劳驾驶是驾车的一项大忌，技术再好也决不许强打精神，勉强上路。为了避免疲劳行车，可以轮换着开。
