校准介质可以是空气或饱和介质：如果以空气为校准介质，将电极放在空气中，擦干膜上的水迹，读数稳定后即可开始校准；在生化发酵过程中，一般是以饱和介质为校准介质；在实消后、接种前、搅拌开至最大、通最大量饱和空气时进行校准；建议在统一的通气时间后进行校准，以统一不同罐批和不同发酵罐的饱和状态；电极校准前必须充分极化。
