当使用热力来杀灭微生物时，灭菌时间和温度的选择取决于是采用湿热还是干热方式。实际操作中，湿热比干热更有效，但需要保持恒定温度3至6小时。热气通过促使在细胞内发生化学变化，破坏细胞蛋白质来杀死微生物。在干燥环境中热传送较慢，而且芽孢含有比繁殖型细胞更少的水分，所以它们更难被杀灭。很重要的一点是让戊二醛汽体和要被杀灭的微生物保持接触，保证汽体的有效穿透和在内腔中提供湿润的杀菌条件 ，以有效的杀死各种微生物。
