钙测定的参考方法是原子吸收分光光度法，使用空气-乙炔焰，钙焰的光吸收特征是422.7nm较火焰光度法灵敏度高，常用作参考方法。普遍应用的是络合滴定法，其优点是操作简便，不需要特殊设备，用血量少，准确性符合需求。
原子吸收分光光度法的测量对象是呈原子状态的金属元素和部分非金属元素，是由待测元素灯发出的特征谱线通过供试品经原子化产生的原子蒸气时，被蒸气中待测元素的基态原子所吸收，通过测定辐射光强度减弱的程度，求出供试品中待测元素的含量。原子吸收一般遵循分光光度法的吸收定律，通常借比较对照品溶液和供试品溶液的吸光度，求得供试品中待测元素的含量。
