美洲虎在大型猫科动物中体形次于虎、狮，排名第三，处于食物链顶端，几乎没有天敌，但其幼崽可能会被虎、狮猎食。
美洲虎食性来源广泛，它们猎食一切能捕捉的动物，包括龟类、鱼、短吻鳄、灵长类、鹿类、西猯、貘、犰狳以及两栖动物等。美洲虎咬力惊人，他们不同于大多数猫科动物善于咬断猎物的喉咙，他们能用强有力的下颚和牙齿直接咬破动物坚硬的头盖骨，甚至海龟坚硬的外壳。
